Informe Ozono_AVATAR_ACONSA

INFORME DE ENSAYO
NUMERO: 492324
Ensayo actividad bactericida
Método Interno

Solicitado por: SERVIPRO-ECOFROG
Av. Corts Catalanes, 13 3º 1ª
08172 SANT CUGAT DEL VALLES

Notas: 1.- Los resultados del ensayo solo dan fe de las muestras analizadas.
2.- No se permite la reproducción total o parcial del presente informe sin previa aprobación escrita Asesoría y Consultoría Sanitaria.
3.- Las muestras han sido analizadas en laboratorios autorizados por el Departamento de Sanitat de la Generalitat de Catalunya.

Nº CONTROL 492324
EQUIPO DE OZONO:
ECOFROG
BLANCO: Modelo: OLK-W-04
REALIZACION ENSAYO SN: ECO.W0419/09/0000183

Agua de red declorada

02/03/2020 a 05/03/2020

OBJETIVO

El ensayo realizado tiene por objetivo evaluar la eficacia desinfectante del agua tratada con ozono
mediante el equipo de Ecofrog. Para ello se ha diseñado un método que se basa en la inoculación de
diferentes microrganismos en el agua tratada y la investigación a diferentes tiempos desde el
tratamiento para comprobar el efecto de la ozonización sobre los inóculos dosificados. Se introduce el
tratamiento con ozono a diferentes temperaturas.

METODO

El método se basa en la inoculación de muestras de agua de red, con cuatro microrganismos diferentes:
- agua de red declorada, tratada con ozono mediante el equipo Ecofrog, a temperatura ambiente, a 30,
35 y 40ºC.
- agua de red declorada sin ozonizar.

La decloración tiene por objetivo eliminar las interferencias del cloro residual libre contenido en el agua
de red.
Una vez inoculadas las muestras se realizan muestreos y siembras en diferentes tiempos, así como un
muestreo y siembra a tiempo 0 (inicial). Las siembras se realizan en medios selectivos para las cepas de
microorganismos seleccionadas para el ensayo.

Las cepas para el ensayo son seleccionadas basándonos en la norma UNE-EN 1276 sobre evaluación de
actividad bactericida de antisépticos y desinfectantes químicos utilizados en productos alimenticios, en
la industria, en el hogar y en colectividad.

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PROCEDIMIENTO DE ENSAYO

Preparación de muestra y tratamiento
Se realiza el estudio con cinco muestras de 0,5L de agua de red, cuatro ozonizadas con el equipo Ecofrog
y una quinta sin ozonizar (Blanco). El tratamiento de ozonización se realiza en modo 100% según el
equipo:

• Muestra 1: Ozonizada mediante Ecofrog. Temperatura ambiente.
Decloración previa: con filtro carbono.

• Muestra 2: Sin ozonizar (Blanco).
Decloración previa: con filtro de carbono y tiosulfato sódico.

• Muestra 3: Ozonizada mediante Ecofrog. Temperatura 30ºC.
Decloración previa: con filtro de carbono.

• Muestra 4: Ozonizada mediante Ecofrog. Temperatura 35ºC.
Decloración previa: con filtro de carbono.

• Muestra 5: Ozonizada mediante Ecofrog. Temperatura 40ºC.
Decloración previa: con filtro de carbono.

Una vez preparadas las muestras se inoculan los diferentes microorganismos:
Preparación de inoculo e inoculación de la muestra
Se emplean 4 cepas para realizar la inoculación de las muestras:

• Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (CECT 240)
• Listeria monocytogenes ATCC 19115 (CECT 5366)
• Escherichia coli CECT 434
• Salmonella enterica ssp enterica CECT 4300

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Se inocula 1ml de las concentraciones de cada microorganismo en las muestras según esquemas 1 y 2

Una vez inoculadas y homogeneizadas, se procede a la siembra de 0,1 ml de las muestras en los
diferentes medios de cultivo, según los tiempos indicados en el esquema 1 y 2, para controlar la
evolución de la carga microbiana en este periodo.

Cepa Concentración ufc/ml
Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (CECT 240) 1,08E+09
Listeria monocytogenes ATCC 19115 (CECT 5366) 5,55E+08
Escherichia coli CECT 434 9,00E+08
Salmonella enterica ssp enterica CECT 4300 7,25E+08

Los medios de cultivo empleados para cada microorganismo, así como las temperaturas y tiempos de
incubación, son los siguientes:

Baird Parker (lot.111024): Para el recuento de Staphylococcus aureus subsp. aureus.

Incubación a 37oC durante 48 horas.

COMPASS Listeria (lot.20030201): Para el recuento de Listeria monocytogenes
Chromocult Coliform (lot.110373):
Incubación a 37ºC durante 48 horas.

Para el recuento de Escherichia coli.

Incubación a 37ºC durante 24 horas.

XLD (lot.110951): Para el recuento de Salmonella enterica ssp enterica

Incubación a 37ºC durante 24 horas.

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Esquema 1. Esquema de inoculación y control de carga microbiana en mue

estras tratada con ozono y sin tratar a temperatura ambiente.

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Esquema 2. Esquema de inoculación y control de carga microbiana en mue

estras tratada con ozono a temperatura 30,35 y 40ºC.

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RESULTADOS OBTENIDOS
ESQUEMA 1

1.- Listeria monocytogenes ATCC 19115 (CECT 5366)

Tiempo(min) 0 10

Muestra
tratada con

ozono

Muestra sin <10 <10
tratar con 6,6x104 6,3x104

ozono

ufc/m agua
tratada

ufc/ml agua
sin tratar

20 30

<10 <10
6,7104 8,7x104

7

Tiempo (min) 40

Muestra tratada
con ozono

Muestra sin tratar
con ozono

ufc/m agua <10 7
tratada 9,4x104

ufc/ml agua sin
tratar

50 60

<10 <10
7,8x104 8,5x104

8

2.- Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (CECT 240)

Tiempo(min) 0 10

Muestra
tratada con

ozono

Muestra sin
tratar con

ozono

ufc/m agua <10 <10
tratada 7,8x104 6,9x104

ufc/ml agua
sin tratar

20 30

<10 <10
4,4x104 6,6 x104

9

Tiempo (min) 40

Muestra tratada
con ozono

Muestra sin tratar
con ozono

ufc/m agua <10
tratada 8,1 x104

ufc/ml agua sin
tratar

50 60

<10 <10
9,3 x104 9,9 x104

10

3.- Escherichia coli CECT 434

Tiempo(min) 0 10

Muestra <10
tratada con 6,1 x104

ozono

Muestra sin <10
tratar con 7,3 x104

ozono

ufc/m agua
tratada

ufc/ml agua
sin tratar

20 30

<10 <10
6,3 x104 6,8 x104

11

Tiempo (min) 40

Muestra tratada
con ozono

Muestra sin tratar
con ozono

ufc/m agua <10
tratada 9,7 x104

ufc/ml agua sin
tratar

50 60

<10 <10
7,2 x104 7,6 x104

12

4.- Salmonella enterica ssp enterica CECT 4300

Tiempo(min) 0 10

Muestra
tratada con

ozono

Muestra sin <10 <10
tratar con 8,0 x104 6,9 x104

ozono

ufc/m agua
tratada

ufc/ml agua
sin tratar

20 30

<10 <10
8,0 x104 6,1 x104

13

Tiempo (min) 40

Muestra tratada
con ozono

Muestra sin tratar
con ozono

ufc/m agua <10 8,
tratada 6,6 x104

ufc/ml agua sin
tratar

50 60

<10 <10
,2 x104 7,9 x104

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ESQUEMA 2
1.- Listeria monocytogenes ATCC 19115 (CECT 5366)

Tiempo(min) 02

Muestra tratada con ozono 30º

Muestra tratada con ozono 35º

Muestra tratada con ozono 40º

ufc/m agua tratada 30º <10 <10
ufc/m agua tratada 35º <10 <10
ufc/m agua tratada 40º 6,1x104 6,3x104

4 68 10

<10 <10 <10 <10
<10 <10 <10 <10
5,7104 6,0x104 5,5x104 5,5x104

15

2.- Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (CECT 240)

Tiempo(min) 02

Muestra tratada con ozono 30º

Muestra tratada con ozono 35º

Muestra tratada con ozono 40º

ufc/m agua tratada 30º <10 <10
ufc/m agua tratada 35º <10 <10
ufc/m agua tratada 40º 4,1x104 4,6x104

4 68 10

<10 <10 <10 <10
<10 <10 <10 <10
4,4x104 4,2x104 4,8x104 4,5x104

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3.- Escherichia coli CECT 434

Tiempo(min) 0 2

Muestra tratada con ozono 30º

Muestra tratada con ozono 35º

Muestra tratada con ozono 40º

ufc/m agua tratada 30º <10 <10
ufc/m agua tratada 35º <10 <10
ufc/m agua tratada 40º 9,1x104 7,8x104

4 68 10

<10 <10 <10 <10
<10 <10 <10 <10
8,8x104 9,4x104 7,1x104 9,4x104

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4.- Salmonella enterica ssp enterica CECT 4300

Tiempo(min) 02

Muestra tratada con ozono 30º

Muestra tratada con ozono 35º

Muestra tratada con ozono 40º

ufc/m agua tratada 30º <10 <10
ufc/m agua tratada 35º <10 <10
ufc/m agua tratada 40º 7,2x104 6,9x104

4 68 10

<10 <10 <10 <10
<10 <10 <10 <10
8,8x104 9,4x104 8,3x104 7,4x104

18

asesoria y consultoria sanitaria, s.l.

Portolá, 10-12 LOCAL 08023 BARCELONA
 93 434 21 24  93 434 21 25
 [email protected]

CONCLUSIONES

En el ensayo a temperatura ambiente, se ha observado un porcentaje de reducción del >99,9% para
todas las cepas estudiadas y a todos los tiempos controlados (desde tiempo inicial hasta tiempo 60
minutos).

En el ensayo a temperatura 30 y35ºC, se ha observado un porcentaje de reducción del >99,9% para
todas las cepas estudiadas y a todos los tiempos controlados (desde tiempo inicial hasta tiempo 10
minutos).

En el ensayo a temperatura 40ºC, no se ha observado reducción de la concentración de ninguna de
las cepas de microorganismos inoculados a ninguno de los tiempos ensayados.

El ensayo realizado ha demostrado la elevada eficacia bactericida frente a las cepas de
microorganismos utilizadas en el mismo, evidenciando que el tratamiento del agua con ozono
realizado por el equipo Ecofrog presenta un elevado poder desinfectante a temperatura ambiente,
y hasta 35ºC. A partir de 40ºC se evidencia que la ozonización no es eficaz.

Barcelona, 7 de marzo de 2020

Sonia Juárez Campos. Xavier Lizana alcazo
Lic.CC.Biológicas. Col.20643-C Farmaceutico
Directora Técnica. Director General ACONSA

Notas: 1.- Los resultados del ensayo solo dan fe de las muestras analizadas.
2.- No se permite la reproducción total o parcial del presente informe sin previa aprobación escrita Asesoría y Consultoría Sanitaria.
3.- Las muestras han sido analizadas en laboratorios autorizados por el Departamento de Sanitat de la Generalitat de Catalunya.

Laboratorio Barcelona: Asesoría y Consultoría Sanitaria, S.L .
Av.Pla del vent, 11 Local
008970 SANT JOAN DESPI Oficina Madrid: Oficina Balears:
Mallorca)T.93 4342124 Fax 93 4342125 Av. Puente Cultural, 5 esc.B 2ªPta. Apart.11 Bartomeu Fons, 11
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T.93 4342124 Fax 93 4342125 T.93 4342124 Fax 93 4342125

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