Seminar in Chemistry (402491)
Title : Parameter’s optimum and kinetics study of -amylase enzyme of Bacillus sp. MB6 isolated from
vegetable waste
ช่อื เรื่อง : การหาคา่ ที่เหมาะสมและการศึกษาจลนศาสตร์ของเอนไซมอ์ ะไมเลสจาก Bacillus sp. MB6 ทีแ่ ยกได้จากเศษผกั
Name : Naruepron Watada ID : 5980103112
Advios : Dr. Saijai Posoongnoen
Date : July 23, 2019 Room : 11.15 Time : 3.20 - 5.50 PM
Abstract :
-Amylase, a very critical enzyme for hydrolysis of starch into simple sugar and it has various
applications in industrial settings. This study reports the identification of Bacillus sp. MB6 which produces
increased amount of enzyme from less required resources. To optimize the yield of enzyme, we used
various combinations of parameters. The most optimized conditions for production of amylase enzyme
from the bacterium Bacillus sp. MB6 are pH of 6, temperature of 37°C, incubation period of 48 h.
Condition of enzymatic activity were also examined and the results show that pH of 6, a temperature of
55 °C, and a reaction time of 30 min are the best available conditions for its activity. Purification of
enzyme by 1.63 fold enhanced the specific activity of enzyme based upon its activity analysis as
compared with unpurified enzyme. Enzyme kinetics studies show the Michaelis constant (Km) to be 5.45
mg/ml and maximum velocity of the reaction (Vmax) to be 24.15 mg/ml/min. In conclusion, we report
enzyme production and purification methodology that exhibit better yield of alpha-amylase for
commercial applications.
บทคดั ยอ่ :
แอลฟาอะไมเลสเป็นเอนไซม์ท่ีมีความสาคัญมากในการไฮโดรไลซิสแป้งให้เป็นน้าตาลอย่างง่ายและมีการนาไปใช้
อย่างหลากหลายในทางอุตสาหกรรม ในการศึกษาคร้ังนี้พบว่าแบคทีเรีย Bacillus sp. MB6 สามารถสร้างเอนไซม์ได้ใน
ปริมาณที่มากข้ึนจากแหล่งวัตถุดิบปริมาณน้อย เพ่ือให้ได้ผลผลิตของเอนไซม์ปริมาณสูงจึงทาการหาค่าพารามิเตอร์ต่าง ๆ ท่ี
เหมาะสมในการผลติ เอนไซม์ ผลการทดลองพบว่าสภาวะที่เหมาะสมที่สุดสาหรับการผลิตเอนไซม์จากแบคทีเรีย bacillus sp.
MB6 คือพีเอช 6 อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส และระยะเวลาการบ่มนาน 48 ชั่วโมง เม่ือทาการทดสอบกิจกรรมการทางาน
ของเอนไซม์พบว่า พีเอช 6 อุณหภูมิ 55 องศาเซลเซียส และเวลาในการเกิดปฏิกิริยา 30 นาที เป็นสภาวะที่ดีที่สุดสาหรับ
กจิ กรรมการทางานของเอนไซม์ การทาใหเ้ อนไซม์บริสทุ ธ์ิ 1.63 เท่าช่วยเพ่มิ กิจกรรมการทางานจาเพาะของเอนไซม์ เม่ือเทียบ
กับเอนไซม์ทไี่ ม่ได้ผา่ นการทาให้บริสุทธิ์ การศึกษาจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์แสดงให้เห็นว่าค่าคงท่ีของไมเคลิส (Km) เท่ากับ
5.45 มลิ ลกิ รัมต่อมิลลลิ ิตร และความเร็วสงู สุด (Vmax) ของการเข้าทาปฏิกิริยา คือ 24.15 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรต่อนาที จาก
การศกึ ษาสรุปไดว้ ่า การผลติ และวธิ กี ารทาให้เอนไซม์บริสทุ ธิ์นน้ั ทาให้ไดแ้ อลฟาอะไมเลสในปริมาณสูง สาหรับการประยุกต์ใช้
ทางการคา้
References :
Paul, J.S., Lall, B.M., Jadhav, S.K., & Tiwari, K.L. (2016). Parameter’s optimum and kinetics study of
-amylase enzyme of Bacillus sp. MB6 isolated from vegetable waste. Process Biochemistry. 16(1),
123-129.
…………………………………………………………………….(Student)………………………………………………………………………………(Advisor)