4-Gram Stain (การย้อมสีแกรม)

Bacteria Gram Stain (การยอ้ มสีแกรม)

Hans Christian Gram

“Gram stain”
“การยอ้ มสีแกรม”

วธิ ีการย้อมสีแกรม

1.Primary stain ใชส้ ี crystal violet ยอ้ มเป็นเวลา 1 นาที

2. Mordant คือ สารที่ช่วยใหเ้ ซลลต์ ิดสีดีข้ึน โดยใช้
สารละลายไอโอดีน (Gram’s iodine) ประมาณ 30 วินาที

3. Decolorization คือการชะสีออกจากเซลลโ์ ดยใชส้ าร
decolorizer ไดแ้ ก่ แอลกอฮอล์ 95%

4. Secondary stain หรือ counterstain ดว้ ยสี safranin O
เป็นนาน 1 นาที







โครงสร้างผนงั เซลลข์ องแบคทีเรียช้นั peptidoglycan

N-acetyl muramic acid (NAM)
N-acetyl glucosamine (NAG)

ความแตกต่างของผนงั เซลลแ์ บคทีเรีบแกรมบวกและแบคทีเรียแกรมลบ

Characteristic Gram positive bacteria Gram negative bacteria
1 จานวนช้นั ท่ีสาคญั
2 องคป์ ระกอบทางเคมี 1 2

ช้นั peptidoglycan ช้นั outer membrane
- NAM, NAG, amino acid - lipopolysaccharide
- teichoic acid - lipoprotein
- lipoteichoic acid - porin protein

3. ความหนาของช้นั peptidoglycan หนาประมาณ 20-30 nm ช้นั peptidoglycan
4. ช้นั outer membrane ไมม่ ี - NAM, NAG, amino acid
5. Porin protein ไม่มี
6. Periplasmic space แคบ หนาประมาณ 8-11 nm
7.Perimeability ต่อโมเลกลุ ของสารต่าง ๆ
More penetrable มี

มี(แทรกอยใู่ นช้นั outer membrane)

กวา้ ง

less penetrable