Heat Sterilization Validation

ภาคผนวก 4
Endotoxin Reduction

1. อบเครื่องแกว และอุปกรณทีใ่ ชสาํ หรบั การตรวจสอบใหปราศจากสารไพโรเจน

2. เตรียม Endotoxin Challenge Vials (ECVs) ทมี่ ี Potency ไมน อยกวา 1000 EU/Vial

3. นํา Endotoxins วางในตอู บฆาเชื้อ (Hot air oven) กระจายใหท ่ัวตู อยางนอยวาง 1
ตําแหนง ท่ตี รงกลางตู วาง ทั้งหมด 5 ตําแหนง เปน (BAKED) และอีก 1 Vial นําไป
ทําเปน Positive Control (PC) เปน (UNBAKED) โดยไมต อง นาํ ไปอบฆาเชื้อ

(5) (3)

(1)
(2)

(4)

4. เปดตู Hot air oven ต้ังอุณหภูมทิ ี่ 2500C เปนเวลา 30 นาที หรอื ตามอุณหภมู ิการใชงาน
จริง

เม่ือครบกําหนดนํา (ECVs) มาตรวจสอบหาปรมิ าณ Endotoxins ท่ีเหลือของ ECVs ท่ีเปน
Baked

และทาํ Negative Control ดวย Water free pyrogen

5. หาปริมาณ Bacterial Endotoxins ท่ีเหลือ โดยใช Limulus amebocyte Lysate (LAL) ดวย
วิธี Gel Clot Method หรือ Photometric techniques (Colorimetric, turbidimetric) Reconstituted
ดวย LAL reagent water และ Vortex ท่ี 30 นาที จึงนาํ ไปหาปริมาณ Endotoxins ทเี่ หลอื โดยเจอื จาง

45

ท่ี 1 : 10 , 1 : , 1 และ 1000 เปรยี บเทียบกับ Control Standard Endotoxins และนาํ มาคํานวณ หา
คา Endotoxins log reduction

คํานวณตามสูตร
Endotoxin Log Reduction = log (UNBAKED) – log (BAKED)

เกณฑก ารยอมรบั
Endotoxin log reduction Not Less Than 3

ความถีใ่ นการตรวจสอบ ทุก 1 ป

46

บรรณานุกรม ( Bibliography )

1. Ira R.Berry ,Robert A.Nash .Pharmaceutical Process Validation Second edition,Revised and
Expanded,Marcel Dekker,Inc.New York.Basel.Hongkong1993
2. Sharp, J. QualityRules in Sterile Products Manufacture Interpharm Press Inc., Buffalo
Grove,II.1992
3. Frederick J. Carleton , James P Agalloco . Validation of Aseptic Pharmaceutical Process. Marcel
Dekker, Inc. Newyork . Basel 1986
4. The United States Pharmacopoeia 24
5. The United States Pharmacopoeia 25
6. Kenneth E. Avis , Herbert A. Lieberman , Leon Lachman . Pharmaceutical Dosage Forms
:Parenteral Medications Volume 3 Second Edication , Revise and Expand . Marcel Dekker , Inc.
Newyork . Basel . HongKong
7. British Pharmacopoeia 2001
8. Nigel A. Halls . Achieving Sterility in Medical and Pharmaceutical Products . Marcel Dekker, Inc.
Newyork . Basel . Hongkong 1994
9. Validation of Steam Sterilization ,PDA Monograph No.1 –2002 Revision November 2001 Draft
#12
10. Fundamentals of an Environmental Monitoring Program, PDA Technical Report No.13 Revised
2001
11. Parametric Release of Pharmaceutical Terminally Sterilized by Moist Heat , PDA Technical
Report No 30
12. Fundamental of an Environmental Monitoring Program , Technical Report No. 13 Revised
Septem/October 2001
13. Remington :The Science and Practice of Pharmacy , Mack Publishing Company
Easton,Pennsylvania 18042,1995

47