คู่มือการปฏิบัติงาน YM

คู่มือการปฏิบัตงิ าน

วิธีการตรวจวเิ คราะหเ์ ช้อื Osmophilic Yeast Mold
โดยวธิ ีการเทเพลท (Pour Plate) และวิธกี ารกรอง (Membrane Filter)

ช่อื เร่อื ง : วธิ ที ดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หนา้ ที่ : 1 จาก 15
สำเนาที่ :
ทบทวนครั้งที่ : วันทอี่ นุมัติ :

ผู้อนมุ ัติ....................................................................................... วันท่ี ………………………………
ตำแหนง่ ………………………………………………….

ผู้ทบทวน..................................................................................... วนั ท่…ี ………….………………..

ตำแหนง่ ………………………………………………….

ผจู้ ัดทาํ ......................................................................................... วนั ท่ี …………..…………………
ตำแหนง่ ………………………………………………….

0. ประวตั กิ ารแก้ไข (Revision history)

วนั /เดอื น/ปี ฉบับแกไ้ ข เลขที่: รายละเอยี ด

ชอื่ เร่อื ง : วิธที ดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หน้าท่ี : 2 จาก 15
สำเนาท่ี :
ทบทวนคร้งั ที่ : วนั ที่อนมุ ัติ :

1. วตั ถปุ ระสงค์

เพ่อื ใหผ้ ู้ปฏิบตั ิงานสามารถตรวจวิเคราะหห์ าปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี Plate count
method และวิธี Membrane Filter ไดอ้ ยา่ งถูกต้อง

2. ขอบขา่ ย
เพือ่ ใชท้ ดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold ในตัวอยา่ งน้ำเชื่อม และน้ำทิง้

3. คำจำกัดความ

Osmophilic microorganism เป็นจุลนิ ทรียท์ ปี่ รับตัวให้เหมาะสมกบั สภาพท่ีมแี รงดันออสโมซิสสูง ๆ
มีการเจรญิ และทวจี ำนวนได้ เชน่ ยสี ต์ท่ีเจริญในอาหารท่ีมีน้ำตาลเข้มข้น โดยทัว่ ไปแล้วยสี ตแ์ ละราเจริญได้ดีใน
อาหารท่ีมีน้ำตาลเขม้ ข้น 2-4% เปน็ สาเหตุสาํ คญั ทที่ ำให้อาหารเสื่อมเสีย เช่น น้ำผึง้ แยม กากน้ำตาล น้ำเช่ือม
และนำ้ ผลไมเ้ ขม้ ขน้ สว่ นแบคทเี รียเจรญิ ได้ดีในอาหารที่มนี ำ้ ตาลประมาณ 0.5-1% ดงั น้นั ในอาหารเลย้ี งเชื้อฟังไจ
จึงตอ้ งมีนำ้ ตาลเข้มขน้ คอ่ นข้างสงู เพอ่ื ยับย้ังการเจริญเติบโตของแบคทเี รยี

4. ผรู้ ับผิดชอบ
……………………………………………………………………………………………………………………………………………….

ชอ่ื เร่อื ง : วธิ ีทดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวธิ ี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หน้าท่ี : 3 จาก 15
สำเนาที่ :
ทบทวนครั้งท่ี : วนั ทอ่ี นุมตั ิ :

5. ขอ้ ควรระวงั และความปลอดภัย

5.1 เครอ่ื งแก้วและอุปกรณท์ ่ใี ชใ้ นการทดสอบตอ้ งล้างดว้ ยน้ำยาล้างเครือ่ งแก้ว ตามดว้ ยน้ำสะอาดแล้ว
ลา้ งด้วยน้ำกลั่นอกี คร้ัง

5.2 การฆา่ เชือ้ อุปกรณ์กอ่ นนำไปใช้ในการทดสอบ

5.2.1 เครื่องแก้วทกุ ประเภทยกเว้นขวดเก็บตัวอย่าง นำไปฆา่ เชื้อในต้อู บ (Oven) ที่อณุ หภมู ิ 170
องศาเซลเซยี ส เป็นเวลาอยา่ งนอ้ ย 1 ช่ัวโมง

5.2.2 กระบอกตวง ฟลาสก์ หุม้ ด้วยฟอยล์ทปี่ ากขวดกอ่ นนำไปอบฆ่าเชอื้

5.2.3 ปิเปต หมุ้ ดว้ ยฟอยล์ทั้ง 2 ด้าน หรอื ใสใ่ นกระบอกสแตนเลสกอ่ นนำไปอบฆ่าเชื้อ

5.2.4 ขวดเก็บตัวอยา่ ง ขวดเจือจางตัวอยา่ ง หรอื ขวดใสอ่ าหารเลยี้ งเช้ือ บัพเฟอร์ ให้ทำการ
ฆา่ เช้ือโดยใช้ Autoclave ที่อณุ หภมู ิ 121 องศาเซลเซียส เปน็ เวลา 15 นาที โดยกอ่ นนำไปเข้าเครื่องให้คลาย
เกลียวออกเล็กนอ้ ย เนือ่ งจากขณะน่ึงจะเกิดความดนั ภายในขวด การปิดขวดแน่นอาจทำใหข้ วดแตกได้ เม่ือครบ
ระยะเวลาการฆ่าเชื้อให้นำออกจากเครอ่ื งแล้วจงึ ปดิ ฝาขวดใหส้ นทิ อีกครัง้

5.2.5 การเตรยี มชุดกรอง (ประกอบดว้ ย ฐานกรองและกรวยกรอง) ก่อนใชง้ านต้องฆา่ เช้ือโดยห่อ
ชดุ กรองรวมกันหรือแยกส่วนด้วยฟอยล์ และนำไปฆ่าเช้ือโดยใช้ Autoclave ท่อี ุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส
เปน็ เวลา 15 นาที

5.3 อุปกรณท์ ใี่ ช้ในการทดสอบและอาหารเลี้ยงเช้ือท่ีทำการทดสอบเสรจ็ แล้วต้องทำการฆ่าเช้ือโดยใช้
Autoclave ที่อณุ หภมู ิ 121 องศาเซลเซยี ส เปน็ เวลา 15 นาที

ชื่อเร่อื ง : วธิ ที ดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หนา้ ที่ : 4 จาก 15
สำเนาที่ :
ทบทวนครัง้ ท่ี : วันที่อนุมตั ิ :

6. ข้ันตอนการปฏิบตั ิงาน
6.1 เครือ่ งมืออปุ กรณ์
6.1.1 ตูบ้ ม่ เพาะเชื้อ (Incubator) อณุ หภูมิ 30 องศาเซลเซียส
6.1.2 ปิเปตปลอดเช้อื (Sterilized Pipette) ขนาด 1, 5 และ 10 มลิ ลลิ ติ ร
6.1.3 กระบอกตวงปลอดเชอื้ (Sterilized Cylinder) ขนาด 250 มลิ ลิลติ ร
6.1.4 ชุดกรอง (Membrane Filtration Units) ประกอบด้วย ฐานกรอง (Filter Base) และ

กรวยกรอง (Filter Funnel)
6.1.5 ชุดปม๊ั สญุ ญากาศ (Vacuum Pump)
6.1.6 ปากคีบ (Forceps)
6.1.7 เอทานอล (Ethanol) ความเข้มข้น 70% และ 90%
6.1.8 ตะเกยี งแอลกอฮอล์พร้อมไฟแช็ค
6.1.9 จานเพาะเชื้อที่ปลอดเช้อื (Sterilized Petri Dishes)
6.1.10 ขวดสำหรับเจือจางตวั อยา่ ง หรอื ขวดดแู รน
6.1.11 กระดาษกรองปลอดเชื้อชนิดที่มีเส้นสีขาว พร้อมกระดาษซับทำจาก cellulose

ปราศจากการปนเปื้อนโลหะหนกั หรอื สารยับย้งั การเจรญิ ของเชื้อ เสน้ ผ่านศนู ย์กลาง 47 มลิ ลเิ มตร ขนาดรู 0.45
ไมโคร เมตร (Sterile Membrane Filters with Absorbent pads, Cellulose Nitrate, white grid, 4 7mm
Dia.0.45 μm)

ชือ่ เรือ่ ง : วธิ ีทดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวธิ ี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหสั เอกสาร : หน้าท่ี : 5 จาก 15
สำเนาที่ :
ทบทวนคร้งั ที่ : วนั ทอ่ี นมุ ัติ :

6.1.12 อะลูมิเนยี มฟอลย์
6.1.13 เคร่อื งชั่ง (Balance Analytical) ละเอียด 2 ตำแหน่ง
6.1.14 อ่างนำ้ ควบคุมอณุ หภูมิ (Water bath)
6.1.15 เตาให้ความรอ้ น (Hotplate)
6.1.16 หลอดทดลอง
6.1.17 ตอู้ บลมรอ้ น (Hot air oven)
6.1.18 ขวดรปู ชมพู่ (Erlenmeyer flask)

6.2 สารละลายบฟั เฟอร์และอาหารเล้ยี งเช้ือ (Buffer and Medium)

6.2.1 น้ำกลั่นปราศจากเช้ือ (Sterile distilled water)

6.2.2 0.1% Buffered peptone water ทม่ี ี Glucose 40% (w/w)

ชั่งผง Buffered peptone water 1 กรัม ละลายผง Buffered peptone water ใน
น้ำกลัน่ 1,000 มิลลิลติ ร จนสารละลายหมด และช่งั ผง Glucose 40 กรัม ละลายในน้ำกลน่ั 100 มลิ ลิลติ ร ผสม
Buffered peptone water และ Glucose ที่เตรียมไว้เข้าด้วยกัน แบ่งบรรจุใส่ขวดสำหรบั เจือจางตัวอย่าง
ขวดละ 225 มิลลลิ ิตร และแบง่ บรรจใุ สห่ ลอดทดลอง หลอดละ 9 มิลลิลติ ร ปิดฝาใหส้ นิท นำไปฆ่าเช้ือโดยใช้
Autoclave ทอี่ ณุ หภูมิ 121 องศาเซลเซยี ส เป็นเวลา 15 นาที

ช่ือเรอื่ ง : วิธที ดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหสั เอกสาร : หนา้ ท่ี : 6 จาก 15
สำเนาท่ี :
ทบทวนครัง้ ท่ี : วนั ท่ีอนมุ ตั ิ :

6.2.3 Malt extract yeast extract 40% w/w glucose agar (MY40G)

ชงั่ อาหารเล้ียงเช้ือ MY40G สำเรจ็ รูป จำนวน 42.7 กรัม ละลายในนำ้ กลั่นจำนวน 100 มิลลิลิตร
ใหค้ วามร้อนด้วยเตาให้ความร้อน (Hotplate) เปน็ เวลา 30 นาที (ระวังอย่าให้เดอื ด) จนกระท่งั ว้นุ ละลาย ยกลง
จากเตาและลดอุณหภูมิให้เหลือตำ่ กว่า 50 องศาเซลเซยี ส (ห้ามฆา่ เช้ือดว้ ย Autoclave) แบง่ บรรจุใส่ขวดดูแรน
กรณีที่ใช ในการ pour plate ให้หลอมละลายอาหารเลีย้ งเชื้อในอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิ (water bath) ซึ่งมี
อุณหภูมิ 50-55 องศาเซลเซียส รอจนกระทงั่ อาหารเย็นลงประมาณ 50 องศาเซลเซยี ส กอ่ นเทลงในจานเพาะเชื้อ
ท่ีปลอดเช้ือ จานเพาะเชื้อละ 15-20 มิลลลิ ิตร ด้วยวธิ ปี ลอดเช้ือจุลินทรยี ์ ท้งิ ไว้จนกระทั่งเย็นและวุ้นแข็งตัว
เก็บอาหารเลย้ี งเช้ือทเ่ี ตรียมได้ไว้ในถุงพลาสติกที่ปิดสนิท หรือภาชนะอืน่ ทีป่ ้องกันการสูญเสียควา มชื้น และ
เกบ็ รักษาทอ่ี ุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส ไดน้ าน 2 สปั ดาห์

6.3 การเตรียมตวั อยา่ ง

6.3.1 ในการเกบ็ ตวั อย่างไม่ควรเก็บจนเตม็ ขวด ควรเหลอื ที่วา่ งไวป้ ระมาณ 2.5 เซนติเมตร จาก
ปากขวดเพ่ือใหม้ อี อกซเิ จนสำหรบั เชื้อจุลินทรยี ์และสะดวกในการเขยา่ ขวดตวั อย่าง

6.3.2 การเตรยี มตวั อยา่ งสำหรบั วธิ ี Plate count method : ชงั่ ตัวอยา่ งน้ำเชอ่ื ม 25±0.1 กรัม
ใส่ในขวดเตรียมตัวอย่าง เติม 0.1% Buffered peptone water ที่มี Glucose 40% (w/w) 225 มิลลิลิตร
ผสมให้ตัวอยา่ งกระจายทั่ว สารละลายตวั อย่างที่ได้ถือว่ามีความเจือจาง 10-1 (ตัวอย่างถูกเจือจาง 10 เท่า)
เตรียมสารละลายตัวอย่างให้มีความเจอื จาง 10-2 10-3 และ 10-4หรอื ระดับความเจือจางที่เหมาะสม โดยปิเปต
ตวั อย่างท่คี วามเจือจาง 10-1 จำนวน 1 มิลลิลิตร ใส่ในหลอดทดลองที่มี BPW 40% Glucose 9 มิลลลิ ติ ร จะได้
ความเจอื จาง 10-2 เขยา่ ใหเ้ ช้ือกระจายทั่วกนั สว่ นที่ความเจอื จาง 10-3 10-4 กเ็ ตรยี มได้ในลกั ษณะเดียวกัน แต่ใช้
ตวั อยา่ งที่มคี วามเจือจาง 10-2 และ 10-3 ตามลำดับ

ชอ่ื เรอื่ ง : วธิ ีทดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวธิ ี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หน้าที่ : 7 จาก 15
สำเนาท่ี :
ทบทวนครัง้ ที่ : วนั ท่อี นุมตั ิ :

6.3.2 การเตรียมตัวอย่างสำหรับวิธี Membrane Filter : ชั่งตัวอย่างน้ำเชือ่ ม 25±0.1 กรัม
ใส่ในขวดรปู ชมพู่ เตมิ นำ้ กลน่ั ที่ปราศจากเช้อื 25-50 มิลลลิ ิตร ผสมใหต้ วั อย่างกระจายท่วั

หมายเหตุ : การทดสอบตัวอยา่ งควรทำทนั ทีภายหลังการเกบ็ ตัวอย่าง ในกรณที ไ่ี มส่ ามารถทำการทดสอบได้ทันที
จะต้องทำการรกั ษาสภาพตัวอย่าง โดยการแช่ขวดตวั อย่างในตเู้ ยน็ ท่ีอุณหภมู ิ 4 องศาเซลเซียส)

6.4 วธิ ีการทดสอบ

6.4.1 วิธีการทดสอบตัวอย่างวธิ ี Plate count method

ปิเปตตวั อยางความเข้มขน้ ละ 1 มิลลลิ ิตร ใสล่ งในเพลท เทอาหารเล้ยี งเชอื้ Malt extract yeast extract
40% w/w glucose agar (MY40G) ที่มีอุณหภูมิประมาณ 45±1 องศาเซลเซียส จำนวน 15-20 มิลลิลิตร
ต่อเพลทโดยทำใน Laminar Flow วนเพลทเพื่อให้ตัวอย างกระจายทั่วเพลท โดยวนไปด้านขวา ด้านซ้าย
ไปข้างหน้า และข้างหลัง ทิศทางละ 5 ครั้ง ระยะเวลาตั้งแต่ถ่ายตัวอย่าง จนกระทั่งเท เพลทด้วย MY40G
ไม่ควรเกิน 15 นาที ตงั้ ไว้ใหอ้ าหารเล้ียงเชอื้ แข็งตวั ท่อี ุณหภูมิห้อง กลบั เพลทใหอาหารเล้ียงเช้ืออยู่ดา้ นบน นำไป
บ่มในตู้บ่มเชือ้ ทอี่ ณุ หภมู ิ 30 องศาเซลเซียส นาน 5-7 วัน

ชอ่ื เรอ่ื ง : วธิ ที ดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวธิ ี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หน้าที่ : 8 จาก 15
สำเนาท่ี :
ทบทวนครัง้ ที่ : วันท่ีอนุมตั ิ :

6.4.2 วธิ ีการทดสอบตัวอย่างวธิ ี Membrane Filter

1. ทาํ ความสะอาดพนื้ ทที่ ดสอบทง้ั กอ่ นและหลังดว้ ยแอลกอฮอล์ทม่ี ีความเข้มข้น 70%

2. การฆ่าเชอ้ื ปากคบี โดยจมุ่ ปากคีบลงในแอลกอฮอล์ความเขม้ ขน้ 90% และผ่านเปลวไฟโดยตรง

3. ติดต้งั ชดุ กรองท่ีผา่ นการฆ่าเชอื้ กับชุดปั๊มสญุ ญากาศ

4. ใชป้ ากคบี คบี แผ่น Membrane filter ลงบน Filter base ปรับเลือ่ น Grid ให้ติดกบั กร วย เพื่อให้
Membrane filter อยูก่ ่ึงกลางระหว่างกรวยกบั ฐาน วางลงบนกงึ่ กลางของฐานกรอง และประกอบกรวยกร องใช้
คบี หนบี ใหแ้ น่น

5. ล้างกระดาษกรองด้วยนำ้ กลั่นทป่ี ราศจากเช้อื อยา่ งนอ้ ย 2-3 คร้ัง กอ่ นกรองตวั อย่าง เขยา่ ขวดตัวอย่าง
(ประมาณ 25 ครง้ั ) เพอื่ ให้จลุ ินทรีย์กระจายตัวท่ัวตัวอยา่ ง เทตัวอยา่ งในปรมิ าตรทีต่ อ้ งการ เปิดปม๊ั สุญญากาศดูด
ตัวอยา่ ง เม่อื เทตัวอย่างเสรจ็ ให้ทําการล้างรอบ ๆ ปากกรวยดว้ ยนำ้ กลนั่ ทป่ี ราศจากเชอ้ื 2-3 คร้งั

6. ปดิ ปัม๊ สญุ ญากาศ แล้วถอดกรวยออกจากฐาน Filter

7. ใชป้ ากคบี ปลอดเชือ้ คบี แผน่ กรองออกจากฐานกรองด้วยความระมัดระวงั วางลงบนอาหารเล้ียงเช้ือ
MY40G ระวังอย่าให้เกิดฟองอากาศ (ทําขั้นตอนนี้ซ้ำหากเกิดฟองอากาศ) หลัง จากนัน้ ใช้ปากคีบกดรอบ
ขอบกระดาษกรอง เพื่อให้แนใ่ จว่าแผ่นกรองสัมผัสอาหารเลยี้ งเชื้ออยา่ งทัว่ ถึง

8. ปิดฝาจานเพาะเชื้อ นำไปเพาะเช้อื ในตูบ้ ่มเพาะเชื้อ 30 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 5-7 วัน

ชือ่ เร่อื ง : วธิ ีทดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวธิ ี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หน้าที่ : 9 จาก 15
สำเนาที่ :
ทบทวนครงั้ ที่ : วันท่อี นมุ ัติ :

6.5 การนับโคโลนีและการคํานวณผลการทดสอบ

นำเพลทออกจากตูบ้ ่มเชื้อเม่ือครบเวลาที่กำหนด จากนั้นนบั จำนวนโคโลนีของเช้ือที่เจริญบน
เพลทท่ีมีจำนวนโคโลนีระหวา่ ง 10-150 โคโลนีต่อเพลท และ 10-150 โคโลนตี ่อ 1 แผ่นกระดาษกรอง ลักษณะ
โคโลนขี องยสี ต์ มีลกั ษณะกลมหรือรปู ไข่ โคโลนีมีสีครีม น่มิ เหลว ผวิ หน้าเรียบ แบน ทบึ แสง และลักษณะโคโลนี
ของรา โคโลนเี ปน็ เสน้ ใยสีขาวและฟู (ภาพท่ี 1)

รา

ยีสต์

ภาพท่ี 1 ลกั ษณะโคโลนีของยีสตแ์ ละรา

ชอื่ เร่อื ง : วิธที ดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหสั เอกสาร : หน้าท่ี : 10 จาก 15
สำเนาท่ี :
ทบทวนครง้ั ท่ี : วันที่อนมุ ตั ิ :

การคำนวณเชอื้ จุลนิ ทรยี ์ท้งั หมดในหนว่ ย CFU/g
ΣC

CFU/g= v ∙ (n1+ 0.1n2) ∙ d
เม่ือ ∑C คอื ผลรวมจำนวนโคโลนีทง้ั หมดจากทุกเพลทที่สามารถนับจำนวนได้

v คือ ปรมิ าณของตวั อย่างทีใ่ ชใ้ นการตรวจวิเคราะห์
n1 คอื จำนวนเพลททีส่ ามารถนับโคโลนีไดเ้ มอื่ ใช้สารละลายตัวอย่างที่มีการเจอื จางนอ้ ย
n2 คือ จำนวนเพลททสี่ ามารถนับโคโลนไี ดเ้ มื่อใชส้ ารละลายตัวอย่างท่มี ีการเจือจางมากขนึ้
d คอื ระดับการเจอื จางของสารละลายตวั แรก (n1)

ตัวอย่างการคำนวณ

ทรี่ ะดบั การเจือจาง 100 เท่า นับจำนวนโคโลนไี ด้ 58 โคโลนี
58

CFU/g = 1 ∙ (1 + 0) ∙ 10-2
= 5800 CFU/g

= 5.8 x 103 CFU/g

ชอ่ื เรอื่ ง : วธิ ีทดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หนา้ ที่ : 11 จาก 15
สำเนาที่ :
ทบทวนครง้ั ที่ : วันท่ีอนุมัติ :

- ในกรณที ่ที ุกเพลทมีจำนวนโคโลนนี ้อยกวา่ 10 โคโลนี ใหน้ บั จำนวนโคนขี องเพลทที่มีระดบั การ เจือจาง
น้อยทส่ี ุดแล้วนำมาคำนวณและรายงานผลเปน็ ESPC/g (estimated standard plate counts/g)

- กรณีที่ทุกเพลทมีจำนวนโคโลนีเกินกว่า 150 โคโลนี ในทุกระดับความเจือจางให้บันทึกเป็น
too numerous to count (TNTC)

- กรณีท่ไี มม่ โี คโลนีเจรญิ บนเพลทเลยในทกุ ระดับความเจือจาง ใหร้ ายงานผลเปน็ <1.0 x ความเจือจาง
น้อยทสี่ ดุ ทที่ ำในหน่วย CFU/g ตวั อยา่ ง

7. บนั ทึกคุณภาพ
……………………………………………………………………………………………………………………………………………….

8. เอกสารอา้ งอิง

นกั สิทธ์ ปัญโญใหญ่. (2559). แมแทบอลิซมึ และการเจริญของจลุ นิ ทรยี ์. คณะเทคโนโลยีการเกษตร มหาวทิ ยาลยั
ราชภัฏเชียงใหม่.

Pitt, J. L., and A. D. Hocking. 1985. Fungi and Food Spoilage, 1st es., 313-333. Academic Press,
New York, NY.

Zottola, E. A., and H. W. Walker. 1984.Osmophilic microorganisms. IN Speck, M. L. (ed.),
Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed, 170-175.
American Public Health Association, Washington, DC.

ชอ่ื เรอื่ ง : วธิ ีทดสอบหาปริมาณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หนา้ ที่ : 12 จาก 15

สำเนาท่ี : ทบทวนคร้งั ที่ : วันที่อนมุ ตั ิ :

Diagram of procedure for Plate count method and Membrane filtration method (1/4)

การเตรยี มสารละลายบัฟเฟอร์

ชือ่ เรอ่ื ง : วธิ ที ดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหสั เอกสาร : หน้าท่ี : 13 จาก 15

สำเนาท่ี : ทบทวนครงั้ ท่ี : วันทอี่ นุมตั ิ :

Diagram of procedure for Plate count method and Membrane filtration method (2/4)

การเตรียมอาหารเลยี้ งเช้ือ

ช่อื เรื่อง : วิธีทดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวิธี

Plate count method และวธิ ี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หน้าที่ : 14 จาก 15

สำเนาที่ : ทบทวนครั้งท่ี : วนั ที่อนมุ ตั ิ :

Diagram of procedure for Plate count method and Membrane filtration method (3/4)

วธิ ีการทดสอบ : วิธี Plate count method

ชือ่ เรือ่ ง : วธิ ีทดสอบหาปรมิ าณ Osmophilic Yeast Mold โดยวธิ ี

Plate count method และวิธี Membrane Filter

หมายเลข : รหัสเอกสาร : หนา้ ที่ : 15 จาก 15

สำเนาท่ี : ทบทวนครัง้ ที่ : วนั ทอี่ นุมตั ิ :

Diagram of procedure for Plate count method and Membrane filtration method (4/4)

วธิ ีการทดสอบ : วิธี Membrane Filter