Techniki biologii molekularnej (1)

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Методи молекулярної б олог ї заснован на:

Вид лення ДНК, РНК та б лк в
Полярн сть молекул ДНК, РНК б лка
Г бридизац я
Ун версальн сть генетичного коду
Нуклеотидна комплементарн сть
Функц ї рестрикц йного ферменту
Ун версальн сть посл довностей: ДНК - РНК - б лок

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Застосування:
встановлення
батьк вства перев рка
спор дненост
встановлення ос б судово-медичн експертизи

Machine Translated by Google

Г бридизац я ДНК - Метод
Саузерн-блот

один з перших метод в, що застосовуються
в молекулярн й д агностиц , суть
методу полягає у взаємод ї досл джуваного
фрагмента нуклеїнової кислоти (ДНК)
молекулярного зонда, що призводить до
утворення г бриду (дуплексу) з дволанцюговою
структурою.

Machine Translated by Google

П вн чна г бридизац я
(нотерн-блот)

метод, що використовується для

визначення РНК, принцип методу, под бний

до зонду Саузерн-блот, зазвичай дає сигнал, пропорц йний к лькост

РНК, наявна на мембран , отже, нтенсивн сть
сигналу п сля виявлення, можна к льк сно
оц нити р вень виявленої РНК.Назва методу
походить в д методу г бридизац ї Саузерна

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Клонування ДНК

Клонування ДНК у векторах (in vivo)

Клонування ДНК in vitro ПЛР

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Етапи реакц ї ПЛР

1. Денатурац я: 45 - 60 сек., приблизно 95 o C

2. З'єднання праймер в (в дпал): 30 - х 30-40
60 сек., приблизно 55 o C

3. Елонгац я (синтез ланцюга ДНК): 30 -
180 сек., приблизно 72 o C

Machine Translated by Google

Застосування методу ПЛР

1. Д агностичн тести:
д агностика генетичних
захворювань виявлення нфекц йних збудник в
(бактер й, в рус в, паразит в) мон торинг та
виявлення пухлинних захворювань, схильност до
виникнення неопластичних захворювань

Machine Translated by Google

Застосування методу ПЛР продовж

2. Генетична дентиф кац я:
експертиза батьк вства судова
експертиза визначення
спор дненост
трансплантолог я 3.

Б отехнолог я 4. Науков
досл дження

5. Археолог я

Machine Translated by Google

Machine Translated by Google

Застосування секвенування:

Секвенування геному людини
14 кв тня 2003 р. був опубл кований
документ про завершення секвенування 99%
геному з точн стю 99,99%.

Д агностика генетичних захворювань
Генетична дентиф кац я Визначення
батьк вства та спор дненост - анал з фрагмент в
STR (коротк тандемн повтори)

Досл дження