เทคนิคการใช้ Micropipette

1.ควรทำให้ภำยในทปิ เปี ยกก่อน ด้วยกำรดูดสำรละลำยท่จี ะดูดเข้ำไปและปล่อยออก 2-3 คร้ัง เพรำะกำรใช้ทปิ ท่แี ห้งจะมคี วำมดนั ไอทปิ

ทำให้ดูดของเหลวได้น้อยกว่ำควำมจริงโดยเฉพำะของเหลวท่ีระเหยง่ำยปริมำตรจะผดิ พลำดมำก

2.อณุ หภูมิกำรใช้งำนไม่เหมำะสม pipette ชนิด air displacement มักจะ calibrate ปริมำตรให้ถูกต้องท่ี 20-25 องศำเซลเซียส

ถ้ำจบั ด้ำม pipette นำน จะทำให้กำรดูดปริมำตรผดิ พลำด นอกจำกนีข้ องเหลวทนี่ ำมำดูดถ้ำมอี ุณหภูมิตำ่ หรือสูงกว่ำอุณหภูมิที่ calibrate
จะทำให้ปริมำตรทดี่ ูดได้ไม่ถูกต้อง

3.กำรเช็ดปลำยทปิ เป็ นเทคนิคที่ไม่ถูกต้องเพรำะวสั ดุท่เี ช็ดจะดูดซับเอำของเหลวในทิปตดิ ออกไปด้วยทำให้ได้

ปริมำตรน้อยกว่ำควำมเป็ นจริง กำรจุ่มทปิ ในของเหลวตืน้ ตืน้ ในขณะดูดจะเป็ นวธิ ีป้องกนั ของเหลวตดิ ภำยนอกทิป

4.กำรใช้ผดิ โหมด

4.1 forward mode (ดูดกด 1 step ปล่อยกด 2 step)
ใช้สำหรับดูดสำรสะลำยทว่ั ไป ถ้ำใช้กบั สำรละลำยท่มี ีควำมหนืดจะทำให้ดูดสำรได้น้อยกว่ำควำมจริง
4.2 reverse mode (ดูดกด 2 step ปล่อยกด 1 step)
ใช้สำหรับดูดสำรละลำยท่ีมคี วำมหนืด ถ้ำใช้กบั สำรละลำยทวั่ ไปจะทำให้ดูดสำรได้มำกกว่ำควำมจริง

5.กำรถือปิ เปตไม่ต้งั ฉำก

5.1 ในกรณดี ูดสำรตวั อย่ำงจะทำให้ปลำยทิปตดิ ผวิ แก้วทำให้ของเหลวในทปิ สูญหำย นอกจำกนีก้ ำรถือปิ เปต เอยี งมี
ผลต่อ surface tension ทำให้เกดิ ควำมแปรปรวนในกำรดูดของเหลวปริมำตรน้อยๆ

5.2 ในกรณปี ล่อยสำรละลำย กำรให้ปลำยทปิ ตดิ ผวิ แก้วจะช่วยให้ปล่อยของเหลวออกจำกทปิ ได้มำกขนึ้

6.กำรใช้ทปิ ไม่ถูกต้อง ใช้ทิปผดิ ขนำด ผดิ รุ่น ผดิ ยหี่ ้อ ทำให้เกดิ กำรสวมทิปไม่สนิทหรือใช้ทปิ ที่รูตนั ทำให้กำรดูด

ของเหลวเข้ำได้น้อยหรือปล่อยออกไม่หมด

7.กำรใช้ทปิ สกปรก ควรล้ำงด้วยเคร่ืองล้ำง Ultrasonic

8.กำรดูดของเหลวเข้ำเร็ว กำรดูดของเหลวเข้ำเร็วจะทำให้ของเหลวเข้ำไม่ครบปริมำตรโดยเฉพำะอย่ำงยงิ่ กรณที ่ี

O ring ของลกู สูบมกี ำรเส่ือมสภำพ

9.กำรปล่อยของเหลวออกเร็ว จะทำให้ของเหลวตดิ ค้ำงในทิปมำก ถ้ำมกี ำรตดิ ค้ำงมำกให้กดไล่ออก 1-2 คร้ัง

10. กำรจุ่มทปิ ในสำรละลำยทป่ี ล่อยออก หรือดูดสำรละลำยภำยนอกเข้ำไปล้ำงทิปจะได้ปริมำตรมำกกว่ำควำมจริง

เพรำะ pipette ชนิดนี้ calibrate ให้ปริมำตรถูกต้องแบบปล่อยออก

11. ใช้ Adjustable automatic pipette ในทุกช่วงปริมำตร เน่ืองจำก Adjustable automatic pipette มคี วำมถูกต้องของ

ปริมำตรทีด่ ูดในแต่ละช่วงไม่เท่ำกนั กล่ำวคือจะมีควำมถูกต้องมำกท่สี ุดในปริมำตรช่วงกลำง ๆ ดงั น้ันกำรใช้ Adjustable
automatic pipette ไปทำ working standard จงึ ผดิ พลำดได้ง่ำย ควรใช้ serological pipette ซึ่งมคี วำมถูกต้องของปริมำตรคงท่ี
หรือใช้ volumetric pipette ถ้ำต้องกำรควำมถูกต้องที่มำกกว่ำ